ヒルシュスプルング病（先天性巨大結腸症）NGS遺伝子検査｜ミネルバクリニック

ECE1, EDN3, EDNRB, GDNF, RET ( 5遺伝子 )

各遺伝子の詳細：
・ECE1遺伝子：
エンドセリン変換酵素1（Endothelin Converting Enzyme 1）をコードする遺伝子です。エンドセリンは血管収縮作用を持つペプチドで、ECE1はエンドセリン前駆体を活性型エンドセリンに変換する酵素です。腸管神経堤細胞の発生と移動に重要な役割を果たしており、この遺伝子の変異はヒルシュスプルング病の発症に関与します。

・EDN3遺伝子：
エンドセリン3（Endothelin 3）をコードする遺伝子です。エンドセリン3は神経堤細胞の増殖、移動、分化に重要なシグナル分子として機能します。腸管への神経節細胞の移動と発達に不可欠であり、この遺伝子の変異はヒルシュスプルング病やワーデンブルグ症候群4型の原因となります。EDN3遺伝子のホモ接合体変異またはヘテロ接合体変異で発症することがあります。

・EDNRB遺伝子：
エンドセリン受容体B（Endothelin Receptor Type B）をコードする遺伝子です。この受容体はエンドセリン3の受容体として機能し、神経堤由来の細胞が腸管に接続する過程で重要な役割を果たします。EDNRB遺伝子のホモ接合体変異ではワーデンブルグ症候群4型を呈することがありますが、ヘテロ接合体変異では他の特徴を持たない孤発性ヒルシュスプルング病を呈することがあります。ただし、この相関は常にみられるわけではありません。

・GDNF遺伝子：
グリア細胞由来神経栄養因子（Glial cell line-Derived Neurotrophic Factor）をコードする遺伝子です。GDNFはRET受容体のリガンドの一つであり、腸管神経節細胞の生存、成長、分化に重要な栄養因子として機能します。神経堤細胞の腸管への移動と、移動後の神経節細胞の維持に必須の役割を果たしており、この遺伝子の変異はヒルシュスプルング病の発症に関与します。

・RET遺伝子：
RETプロトオンコジーン（REarranged during Transfection proto-oncogene）をコードする遺伝子で、ヒルシュスプルング病の最も頻度の高い原因遺伝子です。RET遺伝子は受容体チロシンキナーゼをコードしており、胚発生期における神経堤細胞の腸管への移動を助けるタンパク質を産生します。家族性および孤発性の両方の症例で変異が認められ、遺伝子の全コード領域に広範囲に変異が散在しています。RET遺伝子はダウン症候群とも関連があり、ダウン症候群を合併するヒルシュスプルング病患者の2%にみられます。また、RET遺伝子の活性化変異は多発性内分泌腫瘍症2型（MEN2）の原因となります。RET遺伝子変異によるヒルシュスプルング病の遺伝形式は複雑で、常染色体優性遺伝のパターンを示すこともあれば、不完全浸透度や可変的表現度を示すこともあります。

すべての配列決定技術には限界があります。この分析は次世代シーケンシング（NGS）により実施され、コード領域とスプライス接合部の検査を目的として設計されています。次世代シーケンシング技術と当院のバイオインフォマティクス分析により、偽遺伝子配列やその他の高度に相同な配列の寄与は大幅に減少しますが、これらは配列決定および欠失/重複分析の両方において病原性変異体対立遺伝子を同定するアッセイの技術的能力を時に妨げる可能性があります。

低品質スコアの変異確認および被覆標準を満たすためにサンガー配列決定が使用されます。注文された場合、欠失/重複分析は、１つの完全な遺伝子（頬粘膜スワブ検体および全血検体）および2つ以上の連続するエキソンサイズ（全血検体のみ）のゲノム領域の変化を同定できます。単一エキソンの欠失または重複が時に同定される場合がありますが、この検査では日常的に検出されません。同定された推定欠失または重複は、直交法（qPCRまたはMLPA）により確認されます。

この検査では、疾患を引き起こす可能性がある特定のタイプのゲノム変化は検出されません。これには、転座や逆位、反復伸長（例：三塩基またはヘキサ塩基）、ほとんどの調節領域（プロモーター領域）または深部イントロン領域（エキソンから20bp以上）の変化が含まれますが、これらに限定されません。この検査は体細胞モザイクまたは体細胞変異の検出を目的として設計または検証されていません。

※この検査パネルでは、5つの主要原因遺伝子のみを対象としています。ヒルシュスプルング病の原因遺伝子として10種類以上が同定されていますが、多くの症例では原因がいまなお不明です。孤発性ヒルシュスプルング病の約半数は特定の遺伝子変異と関連していますが、残りの症例では原因が明らかではありません。検査で病原性変異が検出されなくても、疾患を完全に否定することはできません。臨床診断は組織学的検査（直腸生検による神経節細胞の欠如の確認）に基づいて行われます。